「ELISA讲堂」加了防腐剂的临床样本，ELISA还能用吗？科研人员的福音or噩梦？

发布时间：2025/8/7 15:45:29 阅读次数：38

大家好,今天咱们来聊一个实验室里经常让人纠结的问题——加了防腐剂的样本,还能不能愉快地做ELISA？

相信不少小伙伴在收样本的时候,都遇到过这样的灵魂拷问：

“这管血加了EDTA/肝素/叠氮钠,还能测ELISA吗？”

“防腐剂会不会把抗原抗体反应搞崩了？”

“老板让我测的指标,样本偏偏加了防腐剂,我是不是要凉？”

别慌！今天我们就来扒一扒,防腐剂和ELISA之间的爱恨情仇.

1. 防腐剂：是保护神,还是干扰怪？

首先,防腐剂在临床样本里的作用,主要是防止样本降解抑制微生物生长,比如：

EDTA（乙二胺四乙酸）：常用于抗凝血,螯合钙离子,防止凝血.

肝素：另一种抗凝剂,抑制凝血酶活性.

叠氮钠（NaN₃）：强效抑菌剂,常用于长期保存抗体或样本.

硫柳汞：抑菌防腐,过去常用于疫苗或血清保存.

这些防腐剂虽然能保护样本,但它们也可能影响ELISA实验

比如：

改变蛋白构象（让抗原或抗体“变形”）

干扰酶活性（比如HRP辣根过氧化物酶,叠氮钠就是它的“死对头”）

非特异性结合（让抗体乱跑,导致假阳性/假阴性）

所以,关键问题来了：加了防腐剂的样本,到底能不能用？

2. 不同防腐剂对ELISA的影响

（1）抗凝剂：EDTA vs. 肝素

EDTA：一般不影响大多数ELISA,但某些依赖钙离子的检测（比如某些凝血因子补体系统）可能会受影响.

肝素：比EDTA更温和,但高浓度可能干扰某些基于电荷的免疫反应.

结论：如果是常规ELISA（比如测细胞因子激素）,EDTA或肝素抗凝的血浆/血清通常没问题,但最好查查试剂盒说明书,看看厂家有没有特别说明.

（2）叠氮钠（NaN₃）：HRP酶的“天敌”

叠氮钠是辣根过氧化物酶（HRP）的强抑制剂,如果你的ELISA用的是HRP显色系统,那加了叠氮钠的样本可能会让信号直接扑街！

如果样本含叠氮钠,可以透析或稀释

换用碱性磷酸酶（AP）系统的ELISA试剂盒

（3）硫柳汞：逐渐被淘汰,但仍有风险

硫柳汞含汞,可能影响某些蛋白的稳定性,现在很多试剂盒已明确建议避免使用.如果样本里有它,最好换用新鲜样本或确认试剂盒兼容性.

3. 实战建议：如何判断样本能不能用？

（1）先看试剂盒说明书

靠谱的ELISA试剂盒都会在说明书里写明样本类型要求

比如：

“适用于血清血浆（EDTA/肝素抗凝）.”

“避免使用含叠氮钠的样本.”

如果说明书没写？ 直接联系厂家技术支持,别自己瞎试！

（2）做预实验验证

如果样本很珍贵,又不知道防腐剂会不会干扰

可以：

对比实验：用相同样本（加防腐剂 vs. 不加）平行检测,看结果是否一致.

稀释样本：降低防腐剂浓度,减少干扰.

（3）实在不行,换方法！

如果防腐剂干扰太大,可以考虑：换检测技术,纯化样本

记住：
✅ 先查说明书！
✅ 不确定就做对比实验！
✅ 别让防腐剂毁了你的数据！

科研路上,样本处理是门玄学,防腐剂可能是你的朋友,也可能是隐藏的坑.但只要掌握规律,提前规划,就能少走弯路！

说到ELISA检测,如果你的实验经常遇到样本兼容性问题,不妨试试睿信生物的ELISA试剂盒——
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✔ 高灵敏度：低丰度指标也能精准检出
✔ 多种样本兼容：血清血浆细胞上清等广泛适用
✔ 严格质控：批间差小,数据稳定可靠