发布时间：2026/3/27 12:00:58 阅读次数：64
大家好！
今天我们不聊人,聊聊“马”.准确地说,是马骨骼肌原代细胞.
在畜牧兽医 运动生理学甚至肌肉疾病机制研究中,IGF1（胰岛素样生长因子1） 都是一个绕不开的关键分子——它调控细胞增殖 分化,与肌肉生长和修复密切相关.
那么问题来了：如何验证IGF1在马骨骼肌细胞中的功能？如何构建过表达和敲低模型？怎样检测它对细胞增殖 迁移和信号通路的影响？
今天我们以一份真实的客户方案为例,带您看看我们是如何一站式搞定这个项目的！
研究对象：马骨骼肌原代细胞（客户自备）
核心基因：IGF1
实验目标：
构建IGF1过表达质粒 + 合成siRNA
验证干预效果（mRNA水平）
检测细胞功能（增殖 迁移）
探索通路机制（Akt/p-Akt）
二 我们设计的实验方案
小贴士：siRNA“三保一”是我们提供的标准服务,确保至少一条有效,避免无效序列耽误实验进度.
分组设计（共7组）：
① cell
② cell + pcDNA3.1（空载体对照）
③ cell + pcDNA3.1-IGF1（过表达）
④ cell + si-NC（阴性对照）
⑤ cell + si-IGF1-1
⑥ cell + si-IGF1-2
⑦ cell + si-IGF1-3
检测指标：IGF1 mRNA表达（内参GAPDH）
目的：筛选出过表达效率最高 敲低效果最好的干预组,用于后续功能实验
第三步：细胞功能检测（转染48h后）
基于验证结果,我们选取5组进行功能实验：
① cell
② cell + OE-NC（过表达空载体）
③ cell + OE-IGF1（最佳过表达组）
④ cell + si-NC（敲低阴性对照）
⑤ cell + si-IGF1（最佳敲低组）
检测时间点：0h 24h 48h
每组3复孔
看点：IGF1过表达是否促进增殖？敲低是否抑制？
检测时间点：0h 24h 48h
看点：IGF1是否影响细胞“爬行”能力？
指标：Akt p-Akt（Ser473）
内参：GAPDH
看点：IGF1是否激活PI3K/Akt信号通路？
Q：原代细胞难养,你们能处理吗？
A：客户提供细胞后,我们按客户提供的培养条件（DMEM高糖+10% FBS）规范操作,保证细胞状态.
Q：为什么要先做7组验证,再做5组功能？
A：先验证确保干预有效,避免“无效转染”浪费后续实验资源——这是我们对实验严谨性的坚持.
Q：可以只做过表达或只做敲低吗？
A：当然可以！方案可根据您的科学问题灵活调整,我们提供定制化服务.
运动生理与代谢调控
畜禽肌肉品质改良
肌肉疾病靶点筛选
如果您正在开展肌肉相关研究,或对IGF1 Akt通路 原代细胞功能检测有任何疑问,欢迎随时联系我们.
从质粒构建到功能验证,我们为您提供完整解决方案！
联系我们
服务热线
扫一扫，加微信客服
版权所有：泉州市睿信生物科技有限公司 | 闽ICP备18019542号 | 技术支持：阿仪网
