科研 PBS缓冲液预混干粉(2 L of 1×)

产品品牌:睿信生物 商品货号:RXH635

文献($TCount)

说明书

  • 产品售价: 68 300
  • 产品规格: 10 50
  • 产品货期:请咨询客服获取产品货期
  • 保存温度:室温保存
规格
价格库存
  • 商品详情
  • 文献
  • FAQ
反应种属 /
检测范围  
物理性能 液体组分应澄清,无沉淀或絮状物;所有组分应无包装破损。
用途 生物学实验
实验原理 若需获取详细内容及操作程序,敬请下载产品说明书查阅。
特异性 若需获取详细内容及操作程序,敬请下载产品说明书查阅。
重复性 若需获取详细内容及操作程序,敬请下载产品说明书查阅。
回收率 若需获取详细内容及操作程序,敬请下载产品说明书查阅。
试验所需自备试验器材 若需获取详细内容及操作程序,敬请下载产品说明书查阅。
操作程序 若需获取详细内容及操作程序,敬请下载产品说明书查阅。
注意事项 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
问题分析 /
声明 本产品仅限于专业人员的科学研究用, 不得用于临床诊断或治疗, 不得用于食品或药品。

 ELISA试剂盒常见问题与解析

ELISA(酶联免疫吸附试验)作为实验室的“金牌检测员”,在疾病诊断、生物标志物检测、药物研发等领域大显身手。但再成熟的技术,也可能因为一个小细节“闹脾气”——标准曲线拟合不佳、信号忽高忽低、背景噪音干扰……别担心!睿信生物凭借多年ELISA研发经验,帮你揪出问题根源,让实验数据稳稳当当!

一、ELISA实验常见问题大盘点

1. 标准曲线“翻车”——拟合度差、线性不佳

问题表现:标准曲线的R²值低于0.99,甚至出现“S”形或杂乱无章的趋势。
可能原因

标准品稀释错误(梯度没做好或混匀不充分)。

标准品反复冻融导致降解。

酶标板洗涤不彻底,孔间残留液体影响吸光度。
解决方案

标准品现配现用,避免多次冻融,稀释时严格按说明书操作。

确保洗涤步骤规范,洗板机喷嘴无堵塞,手工洗板时甩干并拍干。

如果曲线仍不理想,尝试更换标准品或检查酶标仪波长是否准确。

 

2. 信号值太低——目标蛋白“隐身”了?

问题表现:样本OD值接近空白孔,无法有效检测目标蛋白。
可能原因

样本中目标蛋白浓度过低(低于检测下限)。

抗体失效或孵育时间/温度不足。

样本处理不当(如反复冻融、未加蛋白酶抑制剂)。
解决方案:浓缩样本(超滤离心)或换用高灵敏度ELISA试剂盒。

检查抗体有效期,确保孵育时间充足(可适当延长)。

新鲜样本优先,避免反复冻融,必要时添加保护剂。

3. 背景信号高——全是“噪音”怎么办?

问题表现:空白孔或阴性对照OD值偏高,影响结果判读。
可能原因

封闭不充分(封闭液选择不当或时间不足)。

抗体交叉反应或非特异性结合。

洗涤不彻底,残留试剂导致假阳性。
解决方案

优化封闭条件(常用BSA或脱脂奶粉,封闭时间可延长至1-2小时)。

增加洗涤次数(如从3次增至5次),确保每孔洗涤液加满。

更换特异性更高的抗体,或调整一抗/二抗稀释比例。

4. 重复性差——同一样本结果忽高忽低

问题表现:同一批样本检测,孔间差异大,CV值超过20%。
可能原因

加样操作不一致(手法、速度差异)。

酶标板边缘效应(边缘孔蒸发快,温湿度不均)。

试剂未平衡至室温直接使用。
解决方案

使用多通道移液器,统一加样速度和角度。

孵育时覆盖板盖,避免边缘孔干燥,可弃用边缘孔作空白。

所有试剂使用前室温平衡30分钟,避免温度差异影响反应效率。

二、ELISA实验小贴士:细节决定成败

1.样本处理:血清/血浆避免溶血,细胞裂解液需离心去除碎片,组织样本匀浆充分。

1. 

2.试剂保存:抗体、酶结合物等按说明书要求保存(-20℃分装避免反复冻融)。

3.仪器校准:定期检查移液器准确性,酶标仪做波长和光路校准。

4.对照设置:每板必设空白孔、阴性对照和阳性对照,监控系统误差。

三、遇到问题别慌!ELISA排查流程图

如果实验结果异常,可以按以下步骤快速排查:

检查试剂:是否过期?是否正确保存?

 

回顾操作:孵育时间、温度、洗涤步骤是否规范?

 

分析数据:标准曲线是否正常?对照是否符合预期?

 

重复实验:换新试剂或调整条件后重试。

ELISA虽然操作简单,但“细节魔鬼”常常藏在加样、洗涤、孵育这些基础步骤里。遇到问题时,耐心对照说明书、排查关键环节,往往能事半功倍。如果反复失败,不妨联系试剂盒技术支持——毕竟,好的实验结果=靠谱的试剂+规范的操作+一点点的运气!

我要询价
*联系方式:
(请正确填写手机号,您的联系方式不会被公开)
*内容:


扫一扫,加微信客服

客服电话:

400-833-2227

15260335612