科研 鸡毒支原体抗体(MG Ab)定性检测试剂盒

产品品牌:睿信生物 商品货号:RX-AN2D602646

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  • 产品售价: 2800 2000
  • 产品规格: 96T 48T
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反应种属
检测范围 判定阴阳性
物理性能 试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破损漏气。
用途 用于定性检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中鸡毒支原体抗体(MG Ab)。
实验原理 试剂盒采用间接法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被鸡毒支原体抗体(MG Ab)捕获抗原的包被微孔中,依次加入标本、阴性和阳性对照,再加入HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的鸡毒支原体抗体(MG Ab)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),判定阴阳性。
特异性 /
重复性 板内变异系数小于15%。
回收率 /
试验所需自备试验器材 1、酶标仪(450nm)
2、高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3、37℃恒温箱
4、蒸馏水或去离子水
操作程序 1、从室温平衡 20min 后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回 4℃。
2、设置阴性对照孔、阳性对照孔和样本孔,阴性、阳性对照孔各加 50μL 对照品,样本孔中加入待测样本 50μL,空白孔不加。
3、除空白孔外,对照孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育 60min。
4、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置 1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板 5 次(也可用洗板机洗板)。
5、每孔加入底物 A、B 各 50μL,37℃避光孵育 15min。
6、每孔加入终止液 50μL,15min 内,在 450nm 波长处测定各孔的 OD 值。
注意事项 1、严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温 20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
2、洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
3、消除板底残留的液体和手指印,否则影响 OD 值。
4、底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
6、在储存和温育时避免强光直接照射。
7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
8、任何反应试剂不能接触漂白
问题分析 ①问题描述:标准曲线差
可能原因及相应对策:
1.试剂盒平衡时间不够——不低于 2 个小时的室温平衡
2.吸取及洗涤不充分——充分的吸取及洗涤
3.移液不精确——检查和校正移液器
②问题描述:精密度低
可能原因及相应对策:
1.洗涤不充分——按说明书要求充分洗涤和浸泡
2.混匀不充分和吸取试剂不足——充分混匀和吸取试剂
3.重复利用吸头、容器和覆膜——使用加样器要更换新的吸头、使用新的封板模
4.加样不精确——检查和校正移液器
③问题描述:O.D值低
可能原因及相应对策:
1.每孔加的试剂量不精确——校正移液器,精确加入试剂
2.温育时间不正确——保证充足的温育时间
3.温育温度不正确——试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度
4.酶标记物或底物失效——通过混合酶标记物和底物,颜色迅速显现来检查
5.没有加入终止液——按照说明书实验操作步骤加入终止液
6.超出读数时间读数——在说明书推荐的读数时间内读数
④问题描述:样本值
可能原因及相应对策:
1.不正确的样本储存方式——正确储存样本,使用新鲜样本进行实验
2.不正确的样本收集和处理方法——采取正确的样本收集和处理方法
3.待测物质在样本中含量低——使用新鲜样本,重复实验
声明 该试剂盒仅供研究使用,如将其用于临床诊断或任何其他用途,我公司将不对因此产生的问题负责,亦不承担任何法律责任。
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