科研-大鼠血管内皮钙粘蛋白(VE-cadherin)定量检测试剂盒

产品品牌:睿信生物 商品货号:RX302206R

文献(0)

说明书

  • 产品售价: 2800 2000
  • 产品规格: 96T 48T
  • 产品货期:现货
  • 保存温度:2-8℃
规格
价格库存
  • 商品详情
  • 文献
  • FAQ
反应种属 大鼠
检测范围 0.25μg/mL-8μg/mL
物理性能 试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破损漏气。
用途 定量检测血清、血浆、细胞培养上清液等样本中大鼠血管内皮钙粘蛋白(VE-cadherin)的浓度。
实验原理 本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预包被抗大鼠血管内皮钙粘蛋白(VE-cadherin)抗体(固相抗体)的微孔酶标板中,加入大鼠血管内皮钙粘蛋白(VE-cadherin)校准品和待测样本,再加入另一株 HRP 标记的抗大鼠血管内皮钙粘蛋白(VE-cadherin)抗体(酶标抗体),经过温育与充分洗涤,去除未结合的组分,在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物 A 和 B,底物在 HRP 催化下,产生蓝色产物,在终止液(2M 硫酸)作用下,最终转化为黄色,在酶标仪 450nm波长上测定吸光度(OD 值),吸光度(OD 值)与待测样品中大鼠血管内皮钙粘蛋白(VE-cadherin)的浓度正相关。拟合校准品曲线,可以计算出样本中大鼠血管内皮钙粘蛋白(VE-cadherin)的浓度。
特异性 本试剂盒识别天然和重组大鼠血管内皮钙粘蛋白(VE-cadherin),与结构类似物无交叉。
重复性 板内变异系数均<10%,板间变异系数均<15%。
回收率 回收率在 85%-115%之间。
试验所需自备试验器材 1、酶标仪(450nm)
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml 量筒
操作程序 所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
3、设置标准品孔、0 值孔、空白孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品 50μL,0 值孔加样本稀释液 50μL,空白孔不加,样本孔加待测样本 50μL。
4、除空白孔外,标准品孔、0 值孔和样本孔,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体 100μL。
5、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光孵育 60min。
6、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置 20S,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复 5 次。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡 30s 的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
7、将底物 A 和 B 按 1:1 体积充分混合,所有孔中加入底物混合液 100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光孵育 15min。
8、所有孔加入终止液 50μL,在酶标仪 450nm 波长上读取各孔吸光度(OD 值)。
注意事项 1:如果试剂盒的组份需要再次使用,请确保上一次使用之后没有被污染。
2:酶标板单次未使用完,要谨记密封放到 2-8℃保存。
问题分析 ①问题描述:标准曲线差
可能原因及相应对策:
1.试剂盒平衡时间不够——不低于 2 个小时的室温平衡
2.吸取及洗涤不充分——充分的吸取及洗涤
3.移液不精确——检查和校正移液器
②问题描述:精密度低
可能原因及相应对策:
1.洗涤不充分——按说明书要求充分洗涤和浸泡
2.混匀不充分和吸取试剂不足——充分混匀和吸取试剂
3.重复利用吸头、容器和覆膜——使用加样器要更换新的吸头、使用新的封板模
4.加样不精确——检查和校正移液器
③问题描述:O.D值低
可能原因及相应对策:
1.每孔加的试剂量不精确——校正移液器,精确加入试剂
2.温育时间不正确——保证充足的温育时间
3.温育温度不正确——试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度
4.酶标记物或底物失效——通过混合酶标记物和底物,颜色迅速显现来检查
5.没有加入终止液——按照说明书实验操作步骤加入终止液
6.超出读数时间读数——在说明书推荐的读数时间内读数
④问题描述:样本值
可能原因及相应对策:
1.不正确的样本储存方式——正确储存样本,使用新鲜样本进行实验
2.不正确的样本收集和处理方法——采取正确的样本收集和处理方法
3.待测物质在样本中含量低——使用新鲜样本,重复实验
声明 该试剂盒仅供研究使用,如将其用于临床诊断或任何其他用途,我公司将不对因此产生的问题负责,亦不承担任何法律责任。

咨询我司业务员获取说明书

我要询价
*联系方式:
(请正确填写手机号,您的联系方式不会被公开)
*内容:


扫一扫,加微信客服

销售电话:

15260335612