| 反应种属 | 犬 |
| 检测范围 | 100pmol/mL-1600pmol/mL |
| 物理性能 | 液体组分应澄清，无沉淀或絮状物；所有组分应无包装破损。 |
| 用途 | 定量检测血清、血浆、细胞培养上清液、组织中犬孕酮（PROG）的含量。 |
| 实验原理 | 试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记孕酮（PROG），纯化的抗孕酮（PROG）抗体包被微孔板，在竞争抑制反应中，一定量的固相抗体与生物素标记孕酮（PROG）及非标记抗原（校准品或标本）进行抑制竞争反应，抗体与生物素标记的孕酮（PROG）结合量受非标记抗原量所抑制，非标记抗原量多,抗体与生物素标记的孕酮（PROG）结合就少，反之结合就多；反应平衡后，形成固相抗体-生物素化Syndecan-4，再加入酶标记的亲和素，形成固相抗体-生物素化孕酮（PROG）-酶标-亲合素复合物。经加底物显色后，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值）。随着孕酮（PROG）浓度的升高，OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点，对血清中孕酮（PROG）的减少或升高有可靠的检出性能。 |
| 特异性 | 本试剂盒识别天然和重组犬孕酮（PROG），与结构类似物无交叉。 |
| 重复性 | 批内变异系数 CV%小于 15%，批间变异系数 CV%小于 15%。 |
| 回收率 | 回收率在 85%-115%之间 |
| 试验所需自备试验器材 | 1、酶标仪（450nm） 2、精密移液器及一次性吸头 3、蒸馏水 4、洗瓶或者自动洗板机 5、37℃水浴锅或恒温箱 6、500ml 量筒 |
| 操作程序 | 1. 将各种试剂移至室温平衡两小时，取浓缩洗涤液，根据当批检测数量，用蒸馏水 1：20 稀释，混匀后备用。 2. 将预包被板从密封袋中取出，设一个空白对照孔，不加任何液体；每个校准品设 2 孔，每孔加入对应校准品 50μl；其余每个检测孔直接加待测血清或质控品 50μl。 3. 除空白孔外所有孔加入生物素化抗原 50μl，混匀，贴上封板膜，置 37℃温育 60 分钟。 4. 手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置 10 秒甩干，重复 3 次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤 3 次程序洗板后拍干。 5. 每孔加入酶标亲合素 50μl（空白对照孔除外），混匀，贴上封板膜，置 37℃温育 30 分钟。 6. 手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各孔，静置 10 秒甩干，重复 3 次后拍干。洗板机洗板：选择洗涤 3 次程序洗板后拍干。 7. 每孔加显色剂 A 50μl，显色剂 B 50μl，振荡混匀后，置 37℃避光显色 15 分钟，每孔加终止液 50μl。 用酶标仪读数，取波长450nm，先用空白对照孔调零点，然后测定各孔光密度值（OD值）。 |
| 注意事项 | 1：如果试剂盒的组份需要再次使用，请确保上一次使用之后没有被污染。 2：酶标板单次未使用完，要谨记密封放到 2-8℃保存。 |
| 问题分析 | ①问题描述：标准曲线差 可能原因及相应对策： 1.试剂盒平衡时间不够——不低于 2 个小时的室温平衡 2.吸取及洗涤不充分——充分的吸取及洗涤 3.移液不精确——检查和校正移液器 ②问题描述：精密度低 可能原因及相应对策： 1.洗涤不充分——按说明书要求充分洗涤和浸泡 2.混匀不充分和吸取试剂不足——充分混匀和吸取试剂 3.重复利用吸头、容器和覆膜——使用加样器要更换新的吸头、使用新的封板模 4.加样不精确——检查和校正移液器 ③问题描述：O.D值低 可能原因及相应对策： 1.每孔加的试剂量不精确——校正移液器，精确加入试剂 2.温育时间不正确——保证充足的温育时间 3.温育温度不正确——试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度 4.酶标记物或底物失效——通过混合酶标记物和底物，颜色迅速显现来检查 5.没有加入终止液——按照说明书实验操作步骤加入终止液 6.超出读数时间读数——在说明书推荐的读数时间内读数 ④问题描述：样本值 可能原因及相应对策： 1.不正确的样本储存方式——正确储存样本，使用新鲜样本进行实验 2.不正确的样本收集和处理方法——采取正确的样本收集和处理方法 3.待测物质在样本中含量低——使用新鲜样本，重复实验 |
| 声明 | 该试剂盒仅供研究使用，如将其用于临床诊断或任何其他用途，我公司将不对因此产生的问题负责，亦不承担任何法律责任。 |
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