人JAK2基因检测试剂盒

产品品牌:睿信生物 商品货号:RXQ91

文献($TCount)

  • 产品售价: 399
  • 产品规格: 100T
  • 产品货期:现货
  • 保存温度:2-8℃
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反应种属
检测范围
物理性能 试剂盒的各液体组分应澄清透明、无沉淀或者絮状物。微孔板铝箔袋应真空包装,无破损漏气。
用途
实验原理
特异性
重复性 /
回收率
试验所需自备试验器材 1、酶标仪(450nm)
2、精密移液器及一次性吸头
3、蒸馏水
4、洗瓶或者自动洗板机
5、37℃水浴锅或恒温箱
6、500ml 量筒
操作程序 所有试剂和组分都先恢复到室温,标准品、质控品和样品,建议做复孔。
1、按前面说明书描述的方法,配制好试剂盒各种组分的工作液。
2、从铝箔袋中取出所需板条,剩余的板条用自封袋密封放回冰箱。
3、设置标准品孔、0值孔、空白孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL,0值孔加样本稀释液50μL,空白孔不加;血清/血浆:样本孔中加入待测样本 10 μL+40μL样本稀释液(相当于稀释5倍,根据情况可改变稀释倍数);其他类型样本:样本孔中加入待测样本 50 μL(建议做预实验)
4、除空白孔外,标准品孔、0值孔和样本孔,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL。
5、用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光孵育60min。
6、揭开封板膜,弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置20S,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复5次。若使用自动洗板机,请按洗板机操作程序进行洗板,添加浸泡30s的程序,可以提高检测的精度。洗板结束,加底物前,要在干净不掉屑的纸上,充分拍干反应板。
7、将底物A和B按1:1体积充分混合,所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜盖住反应板,37℃水浴锅或恒温箱避光孵育15min。
8、所有孔加入终止液50μL,在酶标仪450nm波长上读取各孔吸光度(OD值)。
注意事项 1:如果试剂盒的组份需要再次使用,请确保上一次使用之后没有被污染。
2:酶标板单次未使用完,要谨记密封放到 2-8℃保存。
问题分析 ①问题描述:标准曲线差
可能原因及相应对策:
1.试剂盒平衡时间不够——不低于 2 个小时的室温平衡
2.吸取及洗涤不充分——充分的吸取及洗涤
3.移液不精确——检查和校正移液器
②问题描述:精密度低
可能原因及相应对策:
1.洗涤不充分——按说明书要求充分洗涤和浸泡
2.混匀不充分和吸取试剂不足——充分混匀和吸取试剂
3.重复利用吸头、容器和覆膜——使用加样器要更换新的吸头、使用新的封板模
4.加样不精确——检查和校正移液器
③问题描述:O.D值低
可能原因及相应对策:
1.每孔加的试剂量不精确——校正移液器,精确加入试剂
2.温育时间不正确——保证充足的温育时间
3.温育温度不正确——试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度
4.酶标记物或底物失效——通过混合酶标记物和底物,颜色迅速显现来检查
5.没有加入终止液——按照说明书实验操作步骤加入终止液
6.超出读数时间读数——在说明书推荐的读数时间内读数
④问题描述:样本值
可能原因及相应对策:
1.不正确的样本储存方式——正确储存样本,使用新鲜样本进行实验
2.不正确的样本收集和处理方法——采取正确的样本收集和处理方法
3.待测物质在样本中含量低——使用新鲜样本,重复实验
声明 该试剂盒仅供研究使用,如将其用于临床诊断或任何其他用途,我公司将不对因此产生的问题负责,亦不承担任何法律责任。
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