

反应种属 | 不分种属 |
检测范围 | 50nmol/L—800nmol/L |
物理性能 | 液体组分应澄清,无沉淀或絮状物;所有组分应无包装破损。 |
用途 | 用于检测血清、血浆、细胞培养上清液、组织中不对称二甲基精氨酸(ADMA)的含量。 |
实验原理 | 试剂盒采用酶联免疫分析方法。采用生物素标记不对称二甲基精氨酸(ADMA),纯化的抗不对称二甲基精氨酸(ADMA)抗体包被微孔板,在竞争抑制反应中,一定量的固相抗体与生物素标记不对称二甲基精氨酸(ADMA)及非标记抗原(校准品或标本)进行抑制竞争反应,抗体与生物素标记的不对称二甲基精氨酸(ADMA)结合量受非标记抗原量所抑制,非标记抗原量多,抗体与生物素标记的不对称二甲基精氨酸(ADMA)结合就少,反之结合就多;反应平衡后,形成固相抗体-生物素化Syndecan-4,再加入酶标记的亲和素,形成固相抗体-生物素化不对称二甲基精氨酸(ADMA)-酶标-亲合素复合物。经加底物显色后,用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值)。随着不对称二甲基精氨酸(ADMA)浓度的升高,OD值逐渐下降呈良好的线性关系。本试剂盒具有灵敏度高、特异性强、重复性好、操作简单、快速等特点,对血清中不对称二甲基精氨酸(ADMA)的减少或升高有可靠的检出性能。 |
特异性 | 本试剂盒识别不对称二甲基精氨酸(ADMA),与结构类似物无交叉。 |
重复性 | 板内,板间变异系数均<10%。 |
回收率 | 回收率在 85%-115%之间。 |
试验所需自备试验器材 | 1、酶标仪(450nm)2、精密移液器及一次性吸头3、蒸馏水4、洗瓶或者自动洗板机5、37℃水浴锅或恒温箱6、500ml 量筒 |
操作程序 | 1.将各种试剂移至室温平衡两小时,取浓缩洗涤液,根据当批检测数量,用蒸馏水1:20稀释,混匀后备用。2.将预包被板从密封袋中取出,设一个空白对照孔,不加任何液体;每个校准品设2孔,每孔加入对应校准品50μl;其余每个检测孔直接加待测血清或质控品50μl。3.除空白孔外所有孔加入生物素化抗原50μl,混匀,贴上封板膜,置37℃温育60分钟。4.手工洗板:弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置10秒甩干,重复3次后拍干。洗板机洗板:选择洗涤3次程序洗板后拍干。5.每孔加入酶标亲合素50μl(空白对照孔除外),混匀,贴上封板膜,置37℃温育30分钟。6.手工洗板:弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置10秒甩干,重复3次后拍干。洗板机洗板:选择洗涤3次程序洗板后拍干。7.每孔加显色剂A50μl,显色剂B50μl,振荡混匀后,置37℃避光显色15分钟,每孔加终止液50μl。用酶标仪读数,取波长450nm,先用空白对照孔调零点,然后测定各孔光密度值(OD值)。 |
注意事项 | 试剂盒检测范围不等同于样本的浓度范围,如果您的样品中检测物浓度 高于标准品最高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议先做预实验拉梯度,以确定稀释倍数)。 |
问题分析 | ①问题描述:标准曲线差可能原因及相应对策:1.试剂盒平衡时间不够——不低于 2 个小时的室温平衡2.吸取及洗涤不充分——充分的吸取及洗涤3.移液不精确——检查和校正移液器②问题描述:精密度低可能原因及相应对策:1.洗涤不充分——按说明书要求充分洗涤和浸泡2.混匀不充分和吸取试剂不足——充分混匀和吸取试剂3.重复利用吸头、容器和覆膜——使用加样器要更换新的吸头、使用新的封板模4.加样不精确——检查和校正移液器③问题描述:O.D值低可能原因及相应对策:1.每孔加的试剂量不精确——校正移液器,精确加入试剂2.温育时间不正确——保证充足的温育时间3.温育温度不正确——试剂要平衡至室温并保证准确的温育温度4.酶标记物或底物失效——通过混合酶标记物和底物,颜色迅速显现来检查5.没有加入终止液——按照说明书实验操作步骤加入终止液6.超出读数时间读数——在说明书推荐的读数时间内读数④问题描述:样本值可能原因及相应对策:1.不正确的样本储存方式——正确储存样本,使用新鲜样本进行实验2.不正确的样本收集和处理方法——采取正确的样本收集和处理方法3.待测物质在样本中含量低——使用新鲜样本,重复实验 |
声明 | 试剂盒仅供研究使用,如将其用于临床诊断或任何其他用途,我公司将不对因此产生的问题负责,亦不承担任何法律责任。 |
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